Cum sa masuram cresterea populatiei bacteriene

Există mai multe moduri de a măsura creșterea populației de bacterii, unele dintre ele fiind mai complexe decât altele. În timp ce sacrifică un pic de consistență în măsurători, cele mai simple metode sunt destul de exacte și adesea folosite. Cele mai cunoscute sunt observarea și numărarea bacteriilor, măsurarea masei umede și uscate și măsurarea turbidității. Laboratorul școlii dvs. ar trebui să aibă echipamentul și elementele necesare pentru a face cel puțin unul dintre aceste experimente.

conținut

Pași
Metoda 1observarea directă a bacteriilor
Metoda 2măsurarea masei umede și uscate
Metoda 3măsurarea turbidității
Avertismente
Materiale necesare
Surse și cotatii

pași

Metoda 1
Observarea directă a bacteriilor

Imaginea intitulată Măsurarea creșterii bacteriene Pasul 1

Ridicați materialele. Există câteva instrumente speciale pe care ar trebui să le aveți în afară de ceea ce este prezent în majoritatea laboratoarelor. Având instrumentele necesare și containerele în mână facilitează execuția și elimină necesitatea de a merge înainte și înapoi în dulapuri. Este important să știți ce vor fi folosite fiecare element de la început. În plus, merită să cunoaștem niște termeni de bază.

Luați un hemocitometru, numit și "camera Neubauer". Aceste instrumente vin cu o cameră foto, lame și, în unele cazuri, chiar și loupes pentru o vizualizare mai bună și este ușor să le lăsați gata de utilizare. Puteți să le cumpărați în magazine de aprovizionare pentru școli și laboratoare și vor veni cu instrucțiuni care vă vor ghida în acest proces.
Luați două feluri de mâncare Petri și un mâner Drigalski pentru metodele de împrăștiere a suprafeței și adâncimii. Acestea sunt containerele în care vor fi observate bacteriile.
"Cultura" este termenul folosit pentru a descrie creșterea artificială a unui organism în experimente științifice.
Mediul de cultură, sau bulionul, este mediul în care bacteriile se înmulțesc.

Imaginea intitulată Măsurarea creșterii bacteriene Pasul 2

Utilizați vasul Petri cu metoda dorită. Puteți pune bacteriile direct pe ea pentru a le observa cu microscopul. Apoi, observați câte celule bacteriene există.

Imaginea intitulată Măsurarea creșterii bacteriene Pasul 3

Utilizați concentrațiile corecte. Dacă există prea multe bacterii, ele se suprapun între ele și nu pot fi numărate corect. Se diluează cultura prin amestecarea cu mai multă bulion. Dacă sunt prea puține, nu veți avea suficient pentru un număr precis. Filtrați bulionul folosind un sistem de filtrare adecvat.

Imaginea intitulată Măsurarea creșterii bacteriene Pasul 4

Numără bacteriile. Ultimul pas este de a face un număr fizic al bacteriilor. Uită-te la hemocitometru prin lupă și notează suma pe care o poți conta. Comparați această valoare cu alte teste.

Metoda 2
Măsurarea masei umede și uscate

Imaginea intitulată Măsurarea creșterii bacteriene Pasul 5

Aveți la dispoziție echipamentul potrivit. Aceasta implică utilizarea de echipamente costisitoare și durează mult. Dacă laboratorul nu este echipat cu elementele potrivite, încercați o altă metodă. Cu toate acestea, dacă este posibil, măsurarea masei umede și uscate vă oferă citiri mai consecvente. Veți avea nevoie de:

Convecție hidraulică cu încălzire gravă-
Plăci pentru cântărire în aluminiu-
Set de sticle -
Centrifugă sau sistem de filtrare în laborator.

Imaginea intitulată Măsurarea creșterii bacteriene Pasul 6

Cultura ar trebui să fie într-un balon Erlenmeyer. Altfel, puneți-o într-una. În acest moment, trebuie să fie în bulion, deși va fi separat în viitor.

Imaginea intitulată Măsurarea creșterii bacteriene Pasul 7

Uscați o tavă de aluminiu în cuptorul de laborator. O alternativă este utilizarea unei membrane de filtru acetat cu diametre de 47 mm și pori de 0,45 pm. Indiferent de preferința dvs., se cântărește acum să știți cât de mult să scădeați de la măsurători când sunt prezente bacteriile.

Imaginea intitulată Măsurarea creșterii bacteriene Pasul 8

Amestecați flaconul în care a fost inserată cultura și lăsați-o omogenă. Bacteriile se vor scufunda în mod natural din cauza gravității. Se agită ușor, astfel încât acestea să fie distribuite omogen în sticlă. În acest fel veți avea un eșantion mai reprezentativ.

Imagine intitulată Măsurarea creșterii bacteriene Pasul 9

Utilizați o centrifugă pentru a separa bacteriile de bulion. Acest instrument centrifughează flaconul și o contrabalansare la viteză mare, drenând bulionul și lăsând cultura. citit acest articol pentru o descriere mai precisă a procesului.

Imagine intitulată Măsurarea creșterii bacteriene Pasul 10

Răsturnați patiseria și puneți-o pe plăcuța de cântărire. Aruncați bulionul. Nu mai aveți nevoie de ea, dar sticla va fi necesară, deci salvați-o mai târziu.

Imagine intitulată Măsurarea creșterii bacteriene Pasul 11

Clătiți centrifuga și turnați apa de spălare în tava de cântărire. Adăugați balonul cu apă de spălare la bacterii, ceea ce vă va da greutatea umedă.

Imaginea intitulată Măsurarea creșterii bacteriene Pasul 12

Calculați greutatea uscată. Pentru această măsură, puneți tava de cântărire în cuptor la 100 ° C timp de 6 până la 24 de ore și urmați instrucțiunile specifice pentru fiecare echipament. Aveți grijă să nu ridicați temperatura până la punctul de ardere a bacteriilor. Apoi se cântărește și nu uitați să scăpați greutatea plăcii de cântărire.

Metoda 3
Măsurarea turbidității

Imagine intitulată Măsurarea creșterii bacteriene Pasul 13

Luați echipamentul necesar. Veți avea nevoie de o sursă de lumină și un spectrofotometru. Aceste articole sunt disponibile la magazinele de aprovizionare de laborator. Spectrofotometrul oferă instrucțiuni pentru utilizarea corectă a modelului achiziționat. Acesta este un echipament relativ ieftin și ușor de utilizat, una dintre cele mai comune metode de măsurare a creșterii populației bacteriene.

Imagine intitulată Măsurarea creșterii bacteriene Pasul 14

Iluminarea eșantionului. Pe scurt, turbiditatea este legată de opacitatea probei. Ar trebui să obțineți o citire a acestei variabile, care este măsurată în NTU (unități de turbiditate nephelometrică). Echipamentul va trebui calibrat înainte de a se lua turbiditatea exactă a eșantionului.

Imagine intitulată Măsurarea creșterii bacteriene Pasul 15

Luați note. Turbiditatea corespunde cantității de bacterii prezente în eșantion. Spectrofotometrul vă va spune încă ce este procentajul de transmisie (% T). Acest număr va fi mai mare, deoarece turbiditatea este mai mică. Comparați rezultatele diferitelor teste pentru a măsura creșterea populației bacteriene.

avertismente

Deoarece aveți de-a face cu colonii de bacterii, este important să luați măsurile de precauție necesare, cum ar fi purtarea de ochelari de protecție și mănuși. De asemenea, puteți utiliza o mască, mai ales dacă nu știți tipul de bacterii cu care lucrați.
Luați măsuri de precauție cu orice tip de bacterii, chiar și pe cele pe care le considerați inofensive, asigurându-vă că toate tăieturile, tăieturile sau resturile sunt acoperite complet înainte de a începe.