1
Înțelegeți legea lui Beer-Lambert pentru absorbție, A = çlc. Ecuația standard pentru această variabilă este
A = çlc, unde
reprezintă cantitatea de lumină absorbită de proba la o anumită lungime de undă,
ɛ reprezintă absorbția molară,
L reprezintă distanța până la care lumina se deplasează în soluție și
c reprezintă concentrația substanței absorbante pe unitatea de volum.
- Absorbanța poate fi, de asemenea, calculată utilizând raportul dintre intensitatea unei probe de referință și proba necunoscută. Este dată de ecuație A = log10(l0/ l).
- Intensitatea trebuie obținută prin utilizarea unui spectrofotometru.
- Absorbția unei soluții variază în funcție de frecvența undei care trece prin ea. Unele dintre ele vor fi mai absorbite decât altele, în funcție de compoziție. Amintiți-vă să indicați în mod clar ce frecvență de undă este utilizată în calculele dvs.
2
Reordonați elementele formulei Beer-Lambert pentru a găsi absorbția molară. Cu cunoașterea algebrei, putem împărți absorbția după lungime și concentrație pentru a obține rezultatul dintr-o parte a ecuației:
ɛ = A / lc. Acum puteți utiliza această formulă de bază pentru a calcula absorbția molară a unei anumite frecvențe a undelor.
- Absorbanța între citiri poate varia în funcție de concentrația soluției și de forma vasului utilizat pentru a măsura această intensitate. Absorbția molară compensează aceste variații.
3
Aflați valorile necesare pentru a înlocui variabilele din ecuație utilizând spectrofotometria. Un spectrofotometru este un dispozitiv care trece o anumită frecvență de undă de lumină printr-o substanță și detectează cât de multă lumină iese din cealaltă parte. O parte va fi absorbită de soluție, iar restul poate fi utilizat pentru a calcula absorbția sa.
- Pregătiți o soluție cu concentrare cunoscut,c, pentru analiză. Unitatea pentru concentrare este molii sau molii pe litru.
- Pentru a găsi L, măsurați lungimea cuvei. Unitatea pentru lungimi este de centimetri.
- Cu ajutorul unui spectrofotometru, măsurați absorbția pentru o anumită frecvență a undelor luminoase. Unitatea pentru această frecvență luminoasă este de metri, dar majoritatea sunt atât de mici, încât sunt exprimate de obicei în nanometri (nm). Absorbția, pe de altă parte, nu are nici o unitate.
4
Introduceți valoarea fiecărei variabile și rezolvați ecuația de absorbție molară. Luând în considerare valorile obținute pentru
,
c și
L, puneți-le în ecuație
ɛ = A / lc. multiplica
L de
c și împărțiți
de către produsul obținut, pentru a calcula absorbția molară.
- De exemplu, utilizând o cuvă lungă de 1 cm, măsurați absorbabilitatea unei soluții cu o concentrație de 0,05 mol / l. Absorbanța la o lungime de undă de 280 nm a fost egală cu 1,5. Care va fi absorbția molară a soluției?
- ɛ280 = A / lc = 1,5 / (1 × 0,05) = 30 L mol-1 cm-1