Cum se face diluția serială

În chimie, diluția este un proces care reduce concentrația unei substanțe într-o soluție. Când este făcută în serie, este o diluție repetată a unei soluții care amplifică rapid factorul de diluție. Se efectuează, în general, în experimente care necesită soluții foarte diluate cu mare precizie, cum ar fi cele care implică curbele de concentrație pe o scară logaritmică sau pentru a determina densitatea bacteriană. În plus, este utilizat pe scară largă în științele experimentale, cum ar fi biochimia, microbiologia, farmacologia și fizica.

conținut

Pași
Metoda 1efectuarea unei diluări de bază
Metoda 2factorul de calcul și concentrația finală de diluare
Surse și cotatii

pași

Metoda 1
Efectuarea unei diluări de bază

Imaginea intitulată Faceți diluții seriale Pasul 1

Determinați lichidul ideal pentru diluare. Lichidul în care se va dilua substanța este foarte important. Multe soluții vor fi diluate în apă distilată, dar acest lucru nu va fi întotdeauna cazul. Dacă diluția este din bacterii sau alte celule, acestea vor fi probabil diluate într-un mediu de cultură. Lichidul ales va fi utilizat pentru fiecare diluție în serie.

Dacă nu sunteți sigur ce lichid să utilizați, cereți ajutor sau căutați online pentru a vedea dacă alte persoane au făcut deja o diluție similară.

Imaginea intitulată Diluții seriale Pasul 2

Se prepară mai multe eprubete cu 9 ml din lichidul de diluare. Aceste tuburi vor fi probele pure pentru diluare. Proba nediluată va fi adăugată la primul tub și apoi diluată în serie în următoarele tuburi.

O tehnică utilă este de a eticheta toate tuburile înainte de a începe, astfel încât nu există confuzie după obținerea diluțiilor.
Fiecare tub va conține o diluție de zece ori a tubului nediluat. Primul tub va fi o diluție de "1:10", al doilea de "1: 100", al treilea amestec "1: 1000" și așa mai departe. Cu toate acestea, determinați în avans numărul de diluții necesare pentru a evita epuizarea tuburilor sau a lichidului de diluare.

Imaginea intitulată Se diluează seriile Pasul 3

Se prepară o eprubetă cu cel puțin 2 ml de soluție nediluată. Cantitatea minimă necesară pentru efectuarea acestei diluții seriale este de 1 ml de soluție nediluată. Cu toate acestea, dacă nu există decât 1 ml, soluția nu va mai rămâne. Etichetați acest tub cu "SND" pentru "soluție nediluată".

Se amestecă bine înainte de a începe orice diluare.

Imaginea intitulată Diluții în serie. Pasul 4

Faceți prima diluție. Utilizați o pipetă pentru a transfera 1 ml de soluție nediluată din tubul de testare "SND" în eprubeta de etichetă "1:10" conținând 9 ml din lichidul de diluție și amestecați bine. Există acum 1 ml de soluție nediluată în 9 ml de lichid de diluare. Prin urmare, soluția a fost diluată cu un factor de zece.

Faceți a doua diluție. În această parte a diluției seriale, treceți 1 ml din soluția tubului "1:10" în tubul "1: 100", care conține 9 ml de lichid de diluție. Cu toate acestea, amestecați bine tubul "1:10" înainte de a trece lichidul în tubul următor. Apoi, după diluare, amestecați și tubul "1: 100". Astfel, soluția din tubul de testare "1:10" a fost diluată de zece ori în tubul "1: 100".

Imaginea intitulată Se diluează seriile Pasul 6

Extindeți procedura pentru a efectua diluții seriale mai mari. Acest proces poate fi repetat de câte ori este necesar până când se ajunge la soluția dorită. Într-un experiment care implică curbele de concentrație este posibilă utilizarea unei diluții seriale pentru a crea o serie de soluții cu diluții de 1, "1:10", "1: 100" și "1: 1000".

Metoda 2
Factorul de calcul și concentrația finală de diluare

Imaginea intitulată Diluții seriale Pasul 7

Calculați valoarea proporție din diluția finală a diluției seriale. Raportul total de diluție poate fi determinat prin înmulțirea factorului de diluție al fiecărei etape cu etapa finală. Acest lucru poate fi ilustrat matematic prin ecuație D_T = D₁ x D₂ x D₃ x ... x D_n unde D_T este factorul de diluție total și D_n este raportul dintre diluție.

De exemplu, să presupunem că ați făcut o diluție de 1:10 de lichid de patru ori. Conectați factorul de diluție la ecuația: D_T = 10 x 10 x 10 x 10 = 10.000.
Factorul final de diluare al celui de-al patrulea tub în diluția serială este "1: 10000". Concentrația substanței este acum de zece mii de ori mai mică decât soluția originală nediluată.

Imaginea intitulată Diluții seriale Pasul 8

Se determină concentrația soluției după diluare. Pentru a determina concentrația finală a soluției după diluarea în serie, va fi necesară cunoașterea concentrației inițiale. Ecuația este după cum urmează: C_final = C_inițială / D unde C_final este concentrația finală a soluției diluate, C_inițială este concentrația inițială a soluției inițiale și D este proporția predeterminată a diluției.

De exemplu: dacă o soluție celulară inițială are o concentrație de 1.000.000 celule pe ml și raportul de diluție este 1000, care este concentrația finală a probei diluate?
Utilizați ecuația:
- C_final = C_inițială / D
- C_final = 1,000,000 / 1000
- C_final = 1000 celule pe ml

Imaginea intitulată Diluții seriale Pasul 9

Asigurați-vă că toate unitățile se potrivesc. Când efectuați un calcul, este necesar ca unitățile să coincidă întotdeauna la sfârșit. Dacă începeți cu celule pe ml, încercați să terminați cu celule pe ml. Dacă concentrația inițială este părți per milion (ppm), atunci concentrația finală ar trebui să fie, de asemenea, ppm.