Cum să faci o cultură a țesuturilor

Cultura țesutului este o modalitate de a obține mai multe celule dintr-un țesut dat, crescându-le în afara corpului. Pentru a face una, este necesar să creați un mediu artificial în care celulele vor crește. Odată ce au fost cultivate, ele pot fi utilizate în diferite tipuri de studii, inclusiv biochimie tisulară și dezvoltare de medicamente.

conținut

Pași
Partea 1pregătirea pentru a crește
Partea 2realizarea culturii
Surse și cotatii

pași

Partea 1
Pregătirea pentru a crește

Imaginea intitulată Face o cultură tisulară Pasul 1

Determinați ce veți dezvolta. Este posibil să crească atât celulele vegetale, cât și cele animale. Uneori se dorește creșterea țesuturilor extrase direct dintr-o plantă sau animal. În alte cazuri, celulele sunt cultivate dintr-o linie celulară cultivată anterior și stocată.

Culturile noi pot fi create din țesuturi preluate de la un organism. Aceste celule sunt numite cultura primară. Se vor împărți numai până când vor deveni senescenți.
Pentru a crea o linie celulară continuă, trebuie să o schimbați cu ajutorul unor produse chimice sau viruși, astfel încât celulele să continue să se împartă pe o perioadă nedeterminată.

Imaginea intitulată Face o cultura a țesuturilor pasul 2

Pregătiți mediul de cultură. Condițiile necesare vor diferi în funcție de tipul de celulă, dar, în general, va fi necesar să se furnizeze:

Controlat de temperatură. Temperatura ideală va varia în funcție de tipul celulei pe care intenționați să o dezvoltați, dar va fi probabil între 20-45 ° C.
pH controlat. Cel mai bun pH va fi undeva intre 6,0 si 7,5.
Presiune osmotică controlată
Schimbul adecvat de oxigen și dioxid de carbon
hormoni
Factori de creștere
Substratul care furnizează celulelor nutrienții necesari, cum ar fi aminoacizii, carbohidrații, vitaminele și mineralele.
Lumina este esențială dacă doriți să crească celulele de plante care efectuează fotosinteza.

Decideți ce tip de substrat vă va oferi. Multe celule cresc cel mai bine atunci când sunt atașate la un substrat. Tipurile includ:

Substrat solid, numit și aderent. Țesuturile obținute din organe, cum ar fi rinichii, sunt de obicei aderente deoarece sunt fixate în țesutul conjunctiv.
Substrat semi-solid sau monostrat. Acest tip de cultură formează adesea un strat de celule în partea inferioară a recipientului.
Cultură de suspendare. Celulele de acest tip nu trebuie ancorate la substrat. În schimb, ele cresc plutitoare. Celulele sanguine sunt de obicei cultivate în suspensie.

Partea 2
Realizarea culturii

Imaginea intitulată Face o cultura tisulară Pasul 4

Urmați protocoalele producătorului pentru a porni cultura. Există mai multe companii care furnizează materiale și echipamente pentru realizarea culturilor în laboratoare. Când achiziționați materialul, primiți și protocoale pentru a începe cultura. Acestea descriu exact modul în care ar trebui să transferați eșantionul pe care doriți să îl dezvoltați în mediul culturii. Unele companii cunoscute includ:

Brazilia moleculară
Qiagen
Fisher Scientific
Thermo Scientific

Hrăniți celulele dacă sunt mamifere. De obicei, mediul de cultură trebuie să fie completat la fiecare 2-3 zile. Urmați protocoalele producătorului pentru alimentarea celulelor.

Acest proces ar trebui să dureze 20 de minute sau mai puțin.
Celulele vor muri dacă nu furnizați cantitatea potrivită de nutrienți.

Imaginea intitulată Face o cultură a țesuturilor 6

Împărțiți culturile atunci când încep să se aglomereze. Pentru a menține cultura în creștere, poate fi necesar să transferați unele dintre celule într-un disc nou, cu densitate mai mică. Acest lucru va permite atât culturii originale, cât și noii culturi să continue să crească.

De asemenea, este posibilă înghețarea unor culturi pentru lucrările viitoare sau repetarea experimentelor dacă se produce o contaminare. Urmați protocoalele furnizate pentru a determina temperatura de crioconservare sau temperatură de congelare a culturilor.