Cum de a denatura o proteină

Poate doriți să denaturați o proteină pentru un proiect științific sau pur și simplu pentru că sunteți curios să știți cum funcționează. Denaturarea este procesul prin care o substanță își pierde forma și structura datorită acțiunilor forțelor externe, incluzând căldură, acizi și solvenți. Modul exact în care faceți acest lucru depinde de proteina cu care doriți să lucrați, deoarece fiecare necesită agenți de denaturare diferite la diferite niveluri. Cele mai multe proteine pot fi denaturate atâta timp cât știți ce să modificați în mediul înconjurător.

conținut

Pași
Metoda 1denaturarea unei proteine
Metoda 2renovat o proteină
Surse și cotatii

pași

Metoda 1
Denaturarea unei proteine

Imaginea intitulată Denature a Protein Step 1

Utilizați căldură. Aceasta este una dintre cele mai simple și mai comune căi. Când proteina în cauză este prezentă într-o hrană, gătiți-o doar pentru a o denatura. Multe proteine pot fi denaturate prin expunere simplă la o temperatură de cel puțin 100 ° C, ceea ce le permite să coaguleze și să reducă solubilitatea lor.

Timpul de expunere depinde de ceea ce expuneți la căldură. Un ou, de exemplu, se poate găti într-o tigaie la foc mediu în cinci minute, în timp ce o hrană friptă poate dura ore să gătească în cuptor.

Imaginea intitulată Denature a Protein Step 2

Utilizați alcoolul. Aceasta distruge legăturile de hidrogen dintre compușii amidici. Atunci când o proteină este expusă la o soluție de alcool, moleculele sale formează noi legături cu lanțul proteic. Utilizați o soluție de alcool 70% pentru a descompune peretele celular al bacteriilor și a denatura proteina.

Alcoolii concentrați sunt periculoși deoarece sunt inflamabili și toxici. Utilizați întotdeauna echipamente de siguranță complete, inclusiv mănuși și protecția ochilor, și manipulați substanțele într-un mediu sigur, cu temperatură controlată.

Imaginea intitulată Denature a Protein Step 3

Modificați pH-ul. Structura internă a unei proteine poate fi ruptă atunci când mediul său este prea acid sau prea alcalin, deoarece aceste condiții perturbă legăturile ionice care dețin punțile de sare ale proteinei. Adăugați o soluție acidă sau bazică la proteină. Mediul înconjurător trebuie să aibă un pH mai mare de 10 sau mai mic de 4 pentru a încuraja denaturarea.

Imaginea intitulată Denature a Protein Step 4

Încercați sărurile de metale grele. Metalele grele pot perturba legăturile din proteine, determinând pierderea structurii. Sărurile acestor metale, cum ar fi mercurul și plumbul, pot fi utilizate pentru a denatura diferite proteine și sunt disponibile din magazinele chimice. Acestea ar trebui, de asemenea, utilizate cu precauție și manipulate numai cu echipament de protecție adecvat, inclusiv mănuși și protecție pentru ochi.

Metoda 2
Renovat o proteină

Imaginea intitulată Denature a Protein Step 5

Determinați dacă este posibil să se renaște proteina în cauză. Unele forme de denaturare sunt permanente, în timp ce altele pot fi anulate. Gătirea unui ou sau a unei carne, de exemplu, nu poate fi desființată, însă o proteină care a fost expusă la un pH ridicat poate recâștiga forma atunci când este plasată într-un mediu mai neutru.

Imaginea intitulată Denature a Protein Step 6

Eliminați factorul de denaturare. Du-te înapoi în mediul în care proteina este în echilibru. Îndepărtați acidul sau baza, de exemplu, sau aduceți proteina înapoi la o temperatură mai rezonabilă.

Imaginea intitulată Denature a Protein Step 7

Utilizați un kit de renaturare. Multe companii de furnizare de laborator vinde acest material care vă permite să creați cei mai buni parametri pentru a promova o renaturare. Este deosebit de util dacă manipulați proteine într-un mediu de laborator sau experimental.